
载体表面必须具有可进行化学反应的活性基团,以便于生物分子进行偶联。使单位载体上结合的生物分子达到最佳容量,载体应当是惰性的和有足够的稳定性,载体具有良好的生物兼容性,以利于制作不同种类的芯片。
载体类型:玻片、硅片、硝酸纤维素膜、尼龙膜等
膜:优点:有孔性三维结构,与核酸亲和力强,杂交技术成熟,通常无需另外包被。缺点:膜的表面性质不是很均一;单位面积上点样密度低,需要更多的样本量;背景较高;容易卷曲等。所以限制了膜的应用范围。
玻璃:持久的载体,耐受高温和高离子强度;具有不浸润性,使杂交体积降低到最小;疏水表面克服了样点容易扩散的缺点,提高了样点的密度;荧光信号低,不会造成很强的背景干扰;
硅:除了具有玻片的性质外,还有良好的导热性。缺点:不透明,不利于光学检测;具有比较强的表面非特异性吸附;不容易进行表面修饰。
基片处理
目的:要使得要使得基片表面富含活性基团,这种活性基团具有吸附能力和固定能力,能很好的连接生物分子。 方法:表面修饰 表面涂敷
点样
目的:将生物分子放到芯片表面指定的位置。 方法:接触式点样 非接触式点样 点样元件
固定
定义:处理好的基片结合各种生物分子的过程。目的:加强生物分子与基片表面的结合方法:室温放置、紫外交联、烘烤
封闭
定义:固定完以后,用一些试剂将基片表面没有固定生物分子的活性基团反应掉,这一过程称为封闭。目的:降低芯片在使用过程中表面的非特异性结合,提高芯片的灵敏度。封闭试剂:指进行封闭所采用的试剂。常用的封闭试剂:硼氢化纳、三乙醇胺、BSA。
根据作用方式分类